AhR在诱导多能干细胞成骨分化中的作用及补骨脂干预

发布时间：2025-05-11 03:39

　　目的:探讨芳香烃受体(Aryl hydrocarbon receptor,Ah R)在诱导多能干细胞(Induced pluripotent stem cells,i PSCs)成骨分化中的作用,为以Ah R为靶点筛选i PSCs成骨分化诱导剂提供理论基础。同时探讨补骨脂及其活性成分异补骨脂素在i PSCs成骨分化中的作用及对Ah R的影响,为采用以Ah R为靶点的中药或其活性成分体外诱导i PSCs成骨分化提供实验基础。方法:通过添加腺苷、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠建立直接诱导i PSCs成骨分化的方法。检测Ah R在i PSCs成骨分化不同时间点的表达趋势,采用Ah R激动剂和拮抗剂进行干预,探讨Ah R在i PSCs成骨分化中的作用,同时观察Ah R激动剂对雌激素受体α(Estrogen receptorα,ERα)表达的影响。采用补骨脂及其活性成分异补骨脂素对i PSCs成骨分化进行干预,观察它们在i PSCs成骨分化中的作用。基于网络药理学预测补骨脂促进成骨分化的靶点并进行实验验证。检测异补骨脂素对Ah R及其靶基因表达的影响,并基于药物亲和性的靶点稳定性实验探讨其与Ah R是否...

【文章页数】：102 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
提要
Abstract
引言
第一部分 iPSCs的培养与成骨诱导
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 结果
        2.1 i PSCs细胞生长状态
        2.2 多能性基因的表达
        2.3 成骨相关基因的表达
        2.4 茜素红染色
    3 小结
第二部分 AhR在i PSCs成骨向分化中的作用研究
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2.结果
        2.1 Ah R在i PSCs成骨分化中的表达趋势
        2.2 Ah R激动剂对i PSCs成骨分化的影响
        2.3 Ah R拮抗剂对i PSCs成骨分化的影响
        2.4 激活Ah R对ERα 表达的影响
    3.小结
第三部分 补骨脂对i PSCs成骨分化的影响及机制研究
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2.结果
        2.1 PCL对i PSCs增殖的影响
        2.2 PCL对i PSCs成骨分化的影响
        2.3 PCL活性成分与靶点分析
        2.4 药物-靶蛋白-疾病相互作用网络分析
        2.5 PCL对IC3I3-E1成骨分化的影响
        2.6 PCL对PPARγ、Ah R表达的影响
    3.小结
第四部分 异补骨脂素通过Ah R促进i PSCs成骨分化的机制研究
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2.结果
        2.1 IPRN对i PSCs成骨分化的影响
        2.2 IPRN对IC3I3-E1成骨分化的影响
        2.3 IPRN对Ah R及靶基因表达的影响
        2.4 IPRN与Ah R的结合分析
        2.5 Ah R激动剂对IPRN促成骨作用的影响
    3.小结
讨论
    1. 中药与骨再生
    2. iPSCs成骨诱导
    3. Ah R简介
    4. 补骨脂简介
    5. 基于网络药理学分析中药作用机制
参考文献
附录 人诱导多能干细胞(i PSC)质检报告
博士期间发表的学术论文
致谢
查新报告
论文论著



本文编号：4044788