银杏种仁4'-O-甲基吡哆醇类化合物分析及其生物学效应研究

发布时间：2025-06-24 02:34

　　在中国银杏种仁作为食品和药品被广泛的应用,但银杏种仁有毒一直制约着银杏种仁资源的利用。本研究以银杏种仁中有毒物质4'-O-甲基吡哆醇（4'-O-methylpyridoxin,MPN）为研究对象,首先探究银杏种仁中的MPN类化合物在不同产地、生长时期和加工方法等条件下的分布规律;其次研究MPN对人胃粘膜上皮细胞（GES-1）的凋亡作用,以及15d喂养MPN对大鼠生长和代谢的影响,最后考察MPN对不同鼠龄大鼠的维生素B₆类化合物（VB₆）、神经递质和氨基酸代谢的影响。本文的研究结果为全面评价银杏种仁的安全性以及其致毒机理提供重要的理论参考。1.考察中国不同产地银杏种仁中MPN类化合物的含量差异。结果表明:9个产地银杏种仁中MPN、4'-O-甲基吡哆醇-5-糖苷（MPNG）、磷酸吡哆胺（PMP）、磷酸吡哆醛（PLP）、吡哆醇（PN）、吡哆醛（PL）和吡哆胺（PM）的含量分别在112.59–158.81μg/g、64.02–172.83μg/g、3.34–12.73μg/g、21.47–111.30μg/g、205.00–316.72μg/g、44....

【文章页数】：100 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
致谢
摘要
abstract
缩略词表
第一章 前言
    1.1 银杏种仁致毒的研究进展
        1.1.1 银杏种仁致毒的临床表现
        1.1.2 银杏种仁致毒的物质基础
    1.2 银杏中MPN的研究进展
        1.2.1 银杏中MPN的结构与生物合成
        1.2.2 银杏种仁中MPN的分析研究
        1.2.3 银杏种仁中MPN的稳定性研究
        1.2.4 MPN致毒的毒理学研究
        1.2.5 MPN的致毒机理研究
        1.2.6 银杏种仁中毒的解毒方法
        1.2.7 MPN的其他研究
    1.3 本研究的立题背景与意义
    1.4 本研究的主要研究内容
    1.5 技术路线
第二章 不同产地银杏种仁中MPN类化合物的分析
    2.1 材料与方法
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 主要实验试剂与设备
        2.1.3 样品的制备
        2.1.4 高效液相色谱检测条件
        2.1.5 线性方程和定量限
        2.1.6 精密度
        2.1.7 加标回收率
        2.1.8 数据处理与分析
    2.2 结果与分析
        2.2.1 不同产地银杏种仁中MPN类化合物的含量比较
        2.2.2 不同产地银杏种仁中TMPN和 VB₆的含量比较
        2.2.3 不同产地银杏种仁中MPN类化合物的主成分分析
    2.3 讨论
    2.4 本章小结
第三章 不同生长时期银杏种仁中MPN类化合物的变化
    3.1 材料与方法
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 主要实验试剂与设备
        3.1.3 银杏种仁的采样时间
        3.1.4 银杏种仁中MPN类化合物的检测
        3.1.5 数据处理与分析
    3.2 结果与分析
        3.2.1 不同生长时期银杏种仁单果重的变化
        3.2.2 不同生长时期银杏种仁中MPN类化合物的含量比较
        3.2.3 不同生长时期银杏种仁中TMPN和 VB₆的含量比较
        3.2.4 不同生长时期银杏种仁中MPN类化合物的主成分分析
    3.3 讨论
    3.4 本章小结
第四章 干燥和烹饪方法对银杏种仁中MPN类化合物的影响
    4.1 材料与方法
        4.1.1 实验材料
        4.1.2 主要实验试剂与设备
        4.1.3 干燥处理条件
        4.1.4 烹饪处理条件
        4.1.5 数据处理与分析
    4.2 结果与分析
        4.2.1 干燥方法对银杏种仁中MPN类化合物的影响
        4.2.2 干燥方法对银杏种仁中TMPN和 VB₆含量的影响
        4.2.3 烹饪方法对银杏种仁中MPN类化合物的影响
        4.2.4 烹饪方法对银杏种仁中TMPN和 VB₆含量的影响
        4.2.5 不同烹饪方法中银杏种仁中MPN类化合物的主成分分析
    4.3 讨论
    4.4 本章小结
第五章 MPN对人胃黏膜上皮细胞GES-1 的凋亡作用
    5.1 材料与方法
        5.1.0 干燥和烹饪后银杏种仁中MPN类化合物的检测
        5.1.1 实验材料
        5.1.2 主要实验试剂与设备
        5.1.3 不同培养时间MPN对 SHSY5Y细胞抑制率的测定
        5.1.4 MPN对人体细胞的抑制作用测定
        5.1.5 MPN对 GES-1 细胞体外体制作用测定
        5.1.6 Hoechst33342 染色检测细胞凋亡
        5.1.7 Annexin V-FITC荧光染色法检测流式细胞凋亡
        5.1.8 PI染色法流式检测细胞周期
        5.1.9 JC-1 探针检测线粒体膜电位
        5.1.10 Western Bolt测定C-caspase8和Bax蛋白的表达
        5.1.11 数据处理与分析
    5.2 结果与分析
        5.2.1 MPN在不同培养时间下对SHSY5Y细胞的抑制作用
        5.2.2 MPN对几种细胞的抑制作用
        5.2.3 不同MPN浓度对GES-1 细胞的抑制作用
        5.2.4 不同MPN浓度对GES-1 细胞DNA的作用
        5.2.5 不同MPN浓度对GES-1 细胞的凋亡作用
        5.2.6 不同MPN浓度对GES-1 细胞周期的影响
        5.2.7 不同MPN浓度对GES-1 细胞线粒体膜电位的影响
        5.2.8 不同MPN浓度对GES-1 细胞中C-caspase8和Bax表达的影响
    5.3 讨论
    5.4 本章小结
第六章 MPN对大鼠生长和代谢的影响
    6.1 材料与方法
        6.1.1 实验材料
        6.1.2 主要实验试剂与设备
        6.1.3 给药处理和样品收集
        6.1.4 组织病理学观察
        6.1.5 血清中生理生化指标的测定
        6.1.6 血清中游离氨基酸的测定
        6.1.7 血清中AST/GOT、ALT/GPT、LDH和 CK酶活的测定
        6.1.8 血清中抗氧化指标的测定
        6.1.9 血清中MPN和 VB₆的测定
        6.1.10 数据处理与分析
    6.2 结果与分析
        6.2.1 MPN对大鼠的体重和脏器的影响
        6.2.2 MPN对大鼠不同器官的影响
        6.2.3 MPN对大鼠血清生理生化指标的影响
        6.2.4 MPN对大鼠血清中游离氨基酸含量的影响
        6.2.5 MPN对大鼠血清中AST、ALT、LDH和 CK酶酶活的影响
        6.2.6 MPN对大鼠氧化应激体系的影响
        6.2.7 MPN对大鼠血清中MPN和 VB₆的影响
    6.3 讨论
    6.4 本章小结
第七章 MPN对不同鼠龄大鼠代谢的影响
    7.1 材料与方法
        7.1.1 实验材料
        7.1.2 主要实验试剂与设备
        7.1.3 大鼠给药和样品的收集
        7.1.4 大鼠血清和脑组织中MPN和 VB₆的检测
        7.1.5 大鼠血清和脑部5-羟色胺和多巴胺的检测
        7.1.6 大鼠血清和脑部氨基酸类化合物的检测
        7.1.7 数据处理与分析
    7.2 结果与分析
        7.2.1 MPN在大鼠血清和脑部的残留量
        7.2.2 MPN对大鼠血清和脑部VB₆的影响
        7.2.3 MPN对大鼠血清和脑部5-羟色胺和多巴胺的影响
        7.2.4 MPN对大鼠血清氨基酸类化合物的影响
        7.2.5 MPN对大鼠脑部氨基酸类化合物的影响
        7.2.6 不同鼠龄大鼠血清和脑部氨基酸类化合物的主成分分析
    7.3 讨论
    7.4 本章小结
第八章 全文结论和展望
    8.1 主要结论
    8.2 论文主要创新点
    8.3 展望
博士期间发表的论文
参考文献



本文编号：4052366