绵羊肺炎支原体多表位疫苗的研究及免疫试验

发布时间：2025-06-24 04:34

　　绵羊肺炎支原体（Mycoplasma ovipneumoniae，Mo）是引起绵羊和山羊传染性肺炎的病原,主要危害１～３月龄的羔羊。该病原引起的疾病发生于世界多个国家，是影响养羊业发展的主要传染病之一。免疫预防是控制动物传染病的有效手段，因此研究有效的绵羊支原体肺炎疫苗是预防控制本病的有效措施。本论文着眼于近些年发展起来的多表位疫苗技术，结合本实验室前期研究基础，通过鉴定绵羊肺炎支原体免疫原性蛋白的T细胞表位和B细胞表位，并对多个表位进行串联表达和免疫实验，进行了绵羊支原体肺炎多表位疫苗的初步研究。 本论文首先对绵羊肺炎支原体的EF-Tu基因进行了适当优化、合成并进行了原核表达，对获得的43kD的重组蛋白进行了Western-blot检测和动物免疫实验，结果表明该蛋白可与Mo GH3-3株全菌高免羊血清之间发生特异性反应，在43-55kD之间出现了特异性的反应条带，并且能诱导小鼠产生抗体，间接ELISA方法检测为阳性，证明具有较好的免疫原性。然后利用生物信息学软件对EF-Tu和本实验室之前已经验证过具有免疫原性的PDHA蛋白进行了抗原表位预测，对合成的表位肽进行了实验验证，成功选取了...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2.1EF-Tu基因的PCR产物（1：PCR产物；2：DNA分子质量标准）

.1EF-Tu基因的PCR产物（1：PCR产物；ig2.1PCRproductsofEF-Tu（1:PCRprod-Tu基因序列的分析果如图2.2所示。目的片段测序结果39.62%。将绵羊肺炎支原体EF-Tu基基酸序列进行同源性比对（图2.3）....

图2.2绵羊肺炎支原体EF-Tu基因的原始序列和优化序列以及编码氨基酸（黑体和斜体表示优化的核苷酸，第二行表示原始序列，第三行表示它的编码氨基酸）

9图2.2绵羊肺炎支原体EF-Tu基因的原始序列和优化序列以及编码氨基酸（黑体和斜体表示优化的核苷酸，第二行表示原始序列，第三行表示它的编码氨基酸）Fig2.2OriginalandoptimizedDNAsequenceofM.ovipneumoniae....

图2.3绵羊肺炎支原体与其它11种支原体EF-Tu核苷酸序列和氨基酸序列的同源性比较

图2.3绵羊肺炎支原体与其它11种支原体EF-Tu核苷酸序列和氨基酸序列的同源性比较Fig2.3ThehomologicalrelationshipofM.ovipneumoniaewithother11Mycoplasmaspeciesba....

图2.4pET32-a(+)-EF-Tu的酶切鉴定（1：DL10000DNA分子质量标准；2：NcoⅠ和XhoⅠ酶切重组pET32-a(+)-EF-Tu产物）

肺炎支原体与其它11种支原体EF-Tu核苷酸序列和氨基酸序icalrelationshipofM.ovipneumoniaewithother11Mycoplasmanucleotidesequences(A)andaminoacidsequ....

本文编号：4052495