HBsAg与GM-CSF融合乙型肝炎DNA疫苗的基础研究

发布时间：2025-05-19 23:43

　　目的： DNA疫苗因既能诱导体液免疫应答，又能诱导细胞免疫应答而受到广泛关注，但作为治疗性疫苗其免疫效果尚需进一步提高。粒细胞、巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）是一个具有多项潜能的造血生长因子，不仅能刺激造血祖细胞增殖、分化和成熟并从骨髓向外周转移，而且还能活化中性粒细胞、巨噬细胞、DC及其他单核细胞（23），在细胞因子网络中占有重要地位，在免疫反应中具有重要作用。本课题将GM-CSF基因与乙肝病毒表面抗原（HBsAg）基因融合，构建融合乙型肝炎DNA疫苗，旨在借助GM-CSF的免疫佐剂作用，通过基因融合技术提高乙型肝炎DNA疫苗的免疫效果，为进一步探索乙型肝炎治疗性疫苗和融合蛋白疫苗打下基础。 方法： （1） 用PCR方法和基因克隆技术，构建pcDNA3.1-S、pcDNA3.1-GM-CSF、pcDNA3.1-S-GM-CSF和 pcDNA3.1-GM-CSF-S真核表达质粒，分别用酶切和DNA测序进行鉴定； 以上述构建的质粒转染HepG2细胞和COS-7细胞，用ELISA方 ...

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图1-3质粒pcDNA3.1-S-GM-CSF构建路线

33ConstructionwayofplasmidpcDNA3.1-图1-3质粒pcDNA3.1-S-GM-CSF构建cDNA3.1及pEcob6的转染菌JM109FpcDNA3.1(+)及pEcob6的小量提取NA3.1-S-GM-CSF的....

图1-4质粒pcDNA3.1-GM-CSF-S构建路线

36nstructionwayofplasmidpcDNA3.1-GM-CSF-4质粒pcDNA3.1-GM-CSF-S构建路线NA3.1-GM-CSF-S的N端片段GM-CSF基因密码10buffer5ulMgCl23uldNTP1ul

图2-1pcDNA3.1-GM-CSF转染COS-7细胞的免疫细胞化学

Fig2-1ImmunocytochemistryofcellstransfectedwithpcDNA3.1-GM-CSF图2-1pcDNA3.1-GM-CSF转染COS-7细胞的免疫细胞化学Fig2-2Immunocytochemistryof....

图2-2pcDNA3.1-GM-CSF-S转染COS-7细胞的免疫细胞化学

Fig2-2ImmunocytochemistryofcellstransfectedwithpcDNA3.1-GM-CSF-S图2-2pcDNA3.1-GM-CSF-S转染COS-7细胞的免疫细胞化学Fig2-3Immunocytochemistry....

本文编号：4046506