氯喹调控视网膜神经节细胞自噬的研究

发布时间：2025-05-29 03:40

　　 目的:探究氯喹对CoCl₂诱导的视网膜神经节细胞凋亡的保护作用。方法:小鼠视网膜神经节细胞RGC-5细胞加入300μmol/L CoCl₂及30μmol/L氯喹处理24 h后,采用qPCR、Western blot、flow cytometry及MTT法分别检测自噬相关基因Beclin1、LC3b、Atg5、Atg7、自噬相关蛋白LC3、凋亡相关蛋白Caspase-3的表达、细胞凋亡率和细胞存活率。结果:相比于单纯CoCl₂组,CoCl₂及氯喹处理后的RGC-5细胞中,相关基因Beclin1、LC3b、Atg5、Atg7、自噬相关蛋白LC3B、凋亡相关蛋白Caspase-3均被明显抑制（P<0.05）,细胞凋亡率显著下降（P<0.05）,细胞存活率明显升高（P<0.05）。结论:自噬抑制剂氯喹抑制CoCl₂导致的细胞自噬和凋亡,从而保护视网膜神经节细胞。

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【部分图文】：

图1 qPCR检测自噬基因相对表达量

CoCl2能够诱导细胞慢性缺氧损伤而发生凋亡。实验结果显示,用300μmol/L的CoCl2处理后,RGC-5细胞中自噬相关基因Beclin1、LC3b、Atg5及Atg7等均有显著上调(图1、表2)。Westernblot结果也表明,经CoCl2处理后,细胞自噬相关蛋白LC....

图2 Western blot检测自噬蛋白LC3B和凋亡蛋白Caspase-3的表达

表2qPCR检测自噬基因相对表达量(xˉ±s)Tab.2RelativeexpressionofautophagyrelatedgenesdetectedbyqPCR(xˉ±s)GroupsBeclin1LC3bAtg5Atg7C....

图3 流式细胞术检测细胞凋亡情况

图2Westernblot检测自噬蛋白LC3B和凋亡蛋白Caspase-3的表达图4MTT法检测细胞存活率

图4 MTT法检测细胞存活率

图3流式细胞术检测细胞凋亡情况表3细胞凋亡及存活比例(xˉ±s,%)Tab.3Cellapoptosisandsurvivalratio(xˉ±s,%)GroupsEarlyapoptoticcellsLateapoptoticcel....

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