视网膜内皮细胞来源YAP通过LIF调控星形胶质细胞成熟化及其在ROP模型中的作用机制

发布时间：2025-06-19 03:46

　　研究背景和意义:视网膜血管发育初期,星形胶质细胞为内皮细胞搭建生长的骨架结构,供其茎细胞增殖攀附、尖端细胞良好出芽。而内皮细胞同样也可分泌重要因子调节星形胶质细胞的成熟发育,这对于其结构形成的稳定性至关重要。这两者之间独特的相互影响相互制约关系,被称为视网膜血管内皮-神经胶质单元,其稳定发展是整个视网膜网络结构发育的重要环节。Yes相关蛋白(YAP)作为HIPPO通路下游重要的核转录因子,已被证实是早期视网膜血管发育的重要调控因子,内皮细胞特异性YAP缺失将造成血管发育的停滞。除此之外,本课题早期研究表明,内皮细胞特异性YAP缺失不仅造成内皮细胞本身发育的减缓,还影响了星形胶质细胞网络的发育,导致星形胶质细胞的成熟化降低等。由于白血病抑制因子及其受体(LIF-LIFR)在内皮细胞-神经胶质单元中的重要作用,即内皮细胞分泌LIF作用于星形胶质细胞的LIFR后,影响星形胶质细胞的成熟分化过程,但其具体机制尚不清楚。所以我们认为,YAP可能在这一过程中发挥了重要作用。本课题组希望通过观察内皮细胞YAP敲除后星形胶质细胞成熟化发育受损这一现象,揭示YAP通过影响内皮细胞LIF分泌调节星形胶质细胞...

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【部分图文】：

图1 视网膜发育各阶段内皮细胞和星形胶质细胞相互伴行生长

取WildType(WT)小鼠的3天,7天,14天,21天眼球,做视网膜铺片免疫荧光染色和冰冻切片免疫荧光染色,小鼠均为未进行任何处理。血管内皮细胞特异性染料IB4与成熟星形胶质细胞特异性标记物GFAP显示,小鼠发育早期3天、7天均有表达,且血管内皮与星形胶质细胞共同定位于视网....

图2 视网膜发育各阶段内皮细胞和星形胶质细胞相互伴行生长

根据上面的研究发现,星形胶质细胞和血管伴行调节视网膜的发育。取E16,P0,P3,P7,P14,P21小鼠视网膜组织,通过Westernblot方法,检测血小板内皮细胞粘附分子-1（PECAM-1/CD31）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达,并发现其表达含量逐渐增加（如图2....

图3 内皮细胞特异性YAP敲除鼠(Tek-Cre;YAPf/w和Tek-Cre;YAPf/f)明显抑制早期血管和星形胶质细胞的生长发育

由于YAP在视网膜血管畸形中起着重要的作用,课题同时研究了发育中内皮细胞YAP的缺失对血管和星形细胞早期发育的影响。P3和P7的全视网膜免疫荧光染色显示,相较于WT小鼠(YAPf/f)而言,YAP敲除鼠杂合(Tek-cre;YAPf/w)和YAP敲除鼠纯合(Tek-cre;YAP....

图4 内皮细胞特异性YAP敲除鼠(Tek-Cre;YAPf/w和Tek-Cre;YAPf/f)明显抑制中晚期血管的深层生长发育

由于血管在P7时到达视网膜边缘之后,通过不断的尖端细胞出芽,茎细胞增殖等逐渐向下延伸,我们称之为深层血管从发育。研究通过激光共聚焦层扫功能,对发育后期小鼠血管进行层扫,实验发现内皮细胞YAP在血管发育中晚期也同样扮演了重要角色。相较于WT鼠而言,内皮细胞YAP敲除后的杂合和纯合小....

本文编号：4050806