薯蓣皂苷元抗胆管癌作用及机理研究

发布时间：2025-05-08 00:48

　　手术治疗是胆管癌唯一根治的手段,但胆管癌起病隐匿,被查出时大都已是晚期,癌细胞已发生转移,不适合手术治疗,因此寻找敏感性高且毒副作用小的天然抗肿瘤药物对于不能手术切除的胆管癌患者具有重要意义。薯蓣皂苷元(DSG)作为一种用途广泛的甾体化合物,具有多种药用功效。近年来,DSG的抗癌作用在多种不同肿瘤中不断被发现,但对胆管癌的具体作用及机制研究寥寥无几。本论文以胆管癌细胞为研究对象,在体内外水平探究DSG在胆管癌中的作用及机理。细胞水平:MTS法检测发现DSG抑制胆管癌细胞增殖,且呈浓度和时间依赖性,此外,DSG对胆管癌细胞克隆形成能力也具有明显抑制效果。流式检测结果表明DSG使得胆管癌细胞发生G2/M期周期阻滞并诱导凋亡。WB结果显示CyclinB1的蛋白表达水平随药物浓度升高而降低,p21呈升高趋势,这提示DSG或通过对CyclinB1和P21的调控造成细胞周期阻滞,影响细胞周期进程进而导致生长抑制甚至凋亡。我们还发现经药物处理后Bax/Bcl-2的比例显著升高,Caspase3和PARP-1明显发生片段化;细胞色素C在线粒体中表达降低,胞浆中表达升高;z-VAD-fmk(Caspase...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图４Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８染色观察ＤＳＧ对ＣＣＡ细胞形态的影响（２４ｈ，?ｘ２００）??

细胞核染色未见浓缩致密；而药物处理组，随着ＤＳＧ作用浓度的升高，细胞数??量逐渐减少，核内表现出细胞核质固缩甚至胞核碎裂和浓度致密的颗粒状强蓝色??荧光现象，部分细胞形成大小不等的凋亡小体（图４）。以上现象表明ＤＳＧ使??抑制细胞增殖与并诱发细胞凋亡现象。?．??ＱＢ，Ｈ?Ｗｎ?....

图６?ＤＳＧ对ＣＣＡ细胞集落形成能力的影响??

４．３?ＤＳＧ抑制胆管癌细胞克隆形成??克隆形成率是反映细胞群体依赖性和增殖能力的重要指标，于是我们探究了??ＤＳＧ对胆管癌细胞克隆形成能力的影响。如图６、７，对照组细胞集落形成最多，??克隆形成能力最强，集落分布密集且面积较大；随着药物浓度升高最终形成的细??胞克隆数越少，最高....

图７?ＤＳＧ抑制集落形成能力的数据分析??

图７?ＤＳＧ抑制集落形成能力的数据分析??Ｆｉｇ．?７?Ｄａｔａ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｃｌｏｎｅ－ｆｏｒｍｉｎｇ?ａｂｉｌｉｔｙ?ａｆｔｅｒ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＤＳＧ??

图１０?ＤＳＧ对胆管癌ＣＣＡ细胞基因转录水平的影响??

４．４．２?ＤＳＧ对细胞周期相关因子转录和蛋白水平的影响??本实验中，我们使用ｑＲＴ－ＰＣＲ法对这两个重要因子的转录水平进行了检测。??结果如图１０所示，两组细胞经不同浓度ＤＳＧ处理２４ｈ后：对照组与药物处理??．?组相比较，两株细胞的ｐ２１均表现轻微升高，而ＣｙｃｌｉｎＢｌ表达....

本文编号：4044059