OLN-93细胞系分化条件探讨

发布时间：2025-07-07 00:58

　　 目的 OLN-93细胞是实验室常用的少突胶质前体细胞细胞系,多被用于研究少突胶质细胞的分化。本文来探讨OLN-93细胞系的最佳分化条件。方法分别用DMEM、DMEM+三碘甲状腺原氨酸(T3)、DMEM+T3+N2、DMEM/F12、DMEM/F12+T3、DMEM/F12+T3+N2等6种不同培养基条件对OLN-93细胞系进行分化处理,于处理后的第3d和第6d观察细胞形态变化并通过免疫荧光技术鉴定细胞分化情况,同时通过检测髓鞘主要标志物MBP、CNP基因的mRNA和蛋白质的表达情况来分析细胞的分化状态,从而筛选出OLN-93细胞的最优分化培养基。结果比较OLN-93细胞在6种不同条件下的分化情况,免疫荧光、qPCR和Western Blot检测显示出基本一致的结果,DMEM培养基中的细胞分化状态最好,其次为DMEM+T3组,而DMEM+T3+N2和DMEM/F12+T3+N2组最差。结论 DMEM培养基为适宜OLN-93细胞生长分化的最佳培养条件,其他成分如F12、N2均会不同程度的抑制细胞的分化。我们实验发现OLN-93已经丧失了对T3的反应,这一点在使用OLN-93细胞的实验研究中...

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【部分图文】：

图1 不同分化条件对OLN-93细胞内CNP表达影响的免疫荧光检测（DAPI复染细胞核）。

我们对OLN-93细胞在各种不同分化条件下进行分化处理,第3d进行CNP+细胞占总细胞比例的检测,第6d进行MBP+细胞比例的检测,结果显示:与其他5组相比,DMEM培养基中CNP和MBP阳性细胞比例最高(CNP+细胞98.29±0.37%,MBP+细胞97.43±1.22%)....

图2 不同分化条件对OLN-93细胞内MBP表达影响的免疫荧光检测（DAPI复染细胞核）。

继而通过Westernblot检测第3d和第6d不同的分化条件下OLN-93细胞髓鞘相关蛋白的表达水平,发现在DMEM培养基中CNP和MBP表达水平最高(图2)。对照蛋白和mRNA检测的结果,我们发现CNP和MBP表达水平的相对高低与mRNA表达不一致,但在其他条件相同的情况下....

图4.在分化培养液中培养3d(A）、6d(B),OLN-93细胞的髓鞘相关蛋白Western blot检测结果。

图2不同分化条件对OLN-93细胞内MBP表达影响的免疫荧光检测（DAPI复染细胞核）。讨论

本文编号：4056243