动物源弯曲菌分离纯化鉴定方法优化

发布时间：2025-06-06 00:11

　　 目的优化动物源弯曲菌分离纯化鉴定方法。方法采集新鲜样品,选择不同増菌方式获得菌悬液;通过CCDA、弯曲菌显色培养和Skirrow方法分离弯曲菌;生化分析和分子生物学鉴定弯曲菌。与国标方法相比较,评价该法的灵敏度。结果适合于鸡盲肠和动物粪便中弯曲菌的分离纯化鉴定流程为CCDA选择性分离、弯曲菌显色培养基纯化、哥伦比亚血琼脂进行扩增及分子学方法鉴定。使用优化后的方法对东北地区部分鸡屠宰场盲肠样品进行分离,共采集样品200批次,分离鉴定获得空肠弯曲菌共计110株,分离率为55%。结论建立了一套动物源弯曲菌分离纯化鉴定的方法。该方法简单、能有效提高弯曲菌的分离率,解决了弯曲菌分离难,鉴定难,保存难等问题,弥补了国标中的不足,适合于普遍应用及推广。

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【部分图文】：

图1 空肠弯曲菌在增菌培养基上的生长状态

经过微需氧培养后,空肠弯曲菌和结肠弯曲菌在Preston肉汤和Bolton肉汤上均呈混浊菌液,牛血清中混浊度比Preston和Bolton中高,具体结果见图1,建议选用牛血清进行预增菌。3.2分离纯化结果

图2 弯曲菌在CCDA培养基上的生长形态

观察48h培养的琼脂平板上的菌落形态,培养基上生长的灰色、湿润、凸起、光滑圆润、边缘整齐的为疑似单菌落,结果见图2。3.2.2弯曲菌显色培养分离结果

图3 弯曲菌在显色培养基上的生长形态

观察48h培养的琼脂平板上的菌落形态,弯曲菌显色琼脂平板上的可疑菌落通常为红色,结果见图3。3.2.3弯曲菌Skirrow分离培养结果

图4 弯曲菌在Skirrow培养基上的生长形态

Skirrow平板上空肠弯曲菌和结肠弯曲菌不易生长,空肠弯曲菌没有生长,结肠弯曲菌生长速度降低,生长量较其他培养基也有所减少。结肠弯曲菌形态为灰色、扁平、湿润有光泽,沿接种线向外扩散或边缘整齐、发亮,分散凸起的单个菌落,结果见图4。3.3弯曲菌的纯培养结果

本文编号：4049490